地特胰岛素是目前市场上应用于糖尿病临床治疗的长效胰岛素之一,其前体普遍存在表达量低、成本较高等问题。本文中,笔者采用毕赤酵母分泌表达可溶性的地特胰岛素前体,拟通过优化发酵条件提高地特胰岛素前体DesB30的表达量。在高密度发酵条件下,对地特胰岛素前体DesB30的表达进行小试发酵条件的优化,使用5 L玻璃发酵罐进行发酵实验,分别选取pH、温度、诱导前菌体浓度和甲醇流加速度4个因素进行单因素实验,以考察DesB30的最适发酵条件。结果表明:DesB30的最适发酵条件为pH 6.0～6.5,诱导温度26℃,诱导前菌体质量浓度200 g/L,甲醇终流加速度16.3 mL/(h·L)。在确定的最优发酵条件下,DesB30表达量高达2.5 g/L左右,比以往有了显著提升,为后续大规模工业化生产提供了实验基础。

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